期刊论文

中文

西北植物学报

1000-4025

2014

34

3

444-448

10.7606/j.issn.1000-4025.2014.03.0444

中南林业科技大学青年基金（Oj2011046B） 中南林业科技大学***项目（104-0182） 国家自然科学基金青年基金（31200516） 湖南省教育厅优秀青年基金（138150）

本校为第一机构

乌桕是一种重要的木本油料树种。SAD(stearoyl-acyl ACP desaturase)是油料植物中将饱和脂肪酸转变成不饱和脂肪酸的一种关键脱氢酶。为了进一步揭示乌桕SsSAD的功能,该研究在大肠杆菌中表达了该蛋白。结果表明:(1)通过RT-PCR的方法从乌桕种子中克隆出了SsSAD 基因编码区全长序列,并将其克隆到低温诱导的原核表达载体pCold TF上,构建原核重组表达载体pCold TF/SsSAD,转化大肠杆菌BL 21 star (DE3)并获得原核表达工程菌株。(2)通过IPTG法低温诱导表达融合蛋白。该重组质粒在大肠杆菌中得到了高效表达,融合蛋白分子质量约为101kD,且在上清液和包涵体中均有表达,可溶性部分经亲和层析纯化和Western...

Sapiurn sebiferurn is one of the most important oil trees. SAD（stearoyl-acyl ACP desaturase） protein is a dehydrogenase,which is a key factor for transforming saturated fatty acid to unsaturated fatty acid in oil plant. We expressed and purified SsSAD from Sapiurn sebiferum in E. coli to investigate its function. The result suggested that： （1）The full length cDNA encoding SsSAD was amplified by RT-PCR from Sapium sebiferum and cloned into cold shock inducible expression vector pCold TF. The recombinant prokaryotic expression plasmid was tr...