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香榧RAPD分析实验条件的优化

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成果类型:
期刊论文
作者:
胡芳名;张党权;乌云塔娜;谭晓风
作者机构:
中南林学院经济林栽培与育种国家林业局重点实验室,潮南,株洲,412006
[胡芳名; 乌云塔娜; 谭晓风; 张党权] 中南林学院
语种:
中文
关键词:
香榧;RAPD分析;实验条件;优化
关键词(英文):
RAPD;experiment condition;optimization
期刊:
经济林研究
ISSN:
1003-8981
年:
2002
卷:
20
期:
3
页码:
5-7
基金类别:
国家自然科学基金资助项目 (3 9770 63 1)的部分研究内容;
机构署名:
本校为第一机构
院系归属:
林学院
摘要:
试验通过系统的比较研究,建立了香榧RAPD分析的优化反应体系和实验条件,即20μl的反应体系中含有50ng DNAtemplate、1.5μl 10×Buffer、1U Tag NDA聚合酶、2.4 mmol/L MgCl2、240μmol/L dNTPs、0.8 μmol/L Primer.适宜的扩增程序为95℃变性3 min,1个循环;94℃变性30 s,36℃退火30 s,72℃延伸60s,35个循环;72℃延伸5 min,反应终止.该反应体系重复性高,条带亮度均匀,弥散现象少.
摘要(英文):
The reaction protocol for the randomly amplified polymorphism DNA analysis for Torreya grandis is optimized, with the 20 μl reaction system containing 50 ng template, 1.5μl 10 x buffer, 1 U Taq DNA polymerase, 2.4 mmol/L MgCl 2, 240 μmol/L dNTPs, and 0.84 μmol/L primer. The PCR amplification program is 3 min denaturation at 95 ℃ for 1 cycle; 30 s denaturation at 94 ℃, 30 s annealing at 36 ℃, 60 s extension at 72 ℃ for 35 cycles; and 5 min final extension at 72 ℃. This reaction system demonstrated a high repro...

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