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一种显著提高山苍子丛生芽生根率的方法

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成果类型:
专利
发明/设计人:
陈昊;张付豪;裴莹;王阳
申请/专利权人:
中南林业科技大学
专利类型:
发明专利
语种:
中文
申请时间:
2019-11-14
申请/专利号:
CN201911114869.8
公开时间:
2020-01-31
公开号:
CN110731269A
主申请人地址:
410004 湖南省长沙市韶山南路498号
申请地区:
湖南
机构署名:
本校为第一完成单位
主权项:
1.一种显著提高山苍子丛生芽生根率的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤: 1)丛生芽的分离:将山苍子丛生芽分离得单个芽; 2)芽的预处理:将所得单个芽的基部切口用抗褐变剂进行浸泡预处理,所述抗褐变剂中包括虾青素; 3)壮苗培养:将预处理后的单个芽接种至壮苗培养基进行壮苗培养; 4)初代生根培养:将壮苗培养后的单个芽转移到初代培养基进行初代生根培养,诱导根原基的形成; 5)继代生根培养:将初代生根培养后的单个芽转移到继代培养基进行继代生根培养,得生根苗,所述继代培养基中包括山苍子根尖组织提取液。 2.根据权利要求1所述的显著提高山苍子丛生芽生根率的方法,其特征在于,步骤1)中所述分离具体为用无菌解剖刀将经诱导培养所得的山苍子丛生芽进行分离得到生长状态良好的单个芽。 3.根据权利要求1所述的显著提高山苍子丛生芽生根率的方法,其特征在于,步骤2)中所述抗褐变剂中含有蔗糖180~200g/l、虾青素200~300mg/l、硝酸银10~50mg/l;所述浸泡时间为3~5min;所述芽的预处理中还包括:将浸泡完成后的单个芽用无菌吸水纸将抗褐变剂吸干。 4.根据权利要求3所述的显著提高山苍子丛生芽生根率的方法,其特征在于,所述抗褐变剂的制备方法为:取180~200重量份蔗糖溶于蒸馏水中,置于1000体积份的量瓶中,随后加入0.01~0.05重量份的硝酸银,再加入预先溶于8~12体积份乙醇中的虾青素,虾青素为0.2~0.3重量份;最后蒸馏水定容至刻度即得。 5.根据权利要求1所述的显著提高山苍子丛生芽生根率的方法,其特征在于,步骤3)中,所述壮苗培养基为:1/2MS+0.8~1.2mg/l GA3+1.3~1.6mg/l 6-BA+0.3~0.5mg/l IBA+蔗糖25~30g/l+琼脂8~10g/l;所述壮苗培养的时间为7天,温度为24~28℃,光照时间为12小时/天。 6.根据权利要求1所述的显著提高山苍子丛生芽生根率的方法,其特征在于,步骤4)中,所述初代培养基为:1/2MS+0.3~0.5mg/l IBA+0.1~0.3mg/l NAA;所述初代生根培养条件为:黑暗条件下培养1-2天,温度为24~28℃。 7.根据权利要求1所述的显著提高山苍子丛生芽生根率的方法,其特征在于,步骤5)中,所述继代培养基为1/2MS+0.3~0.5mg/l IBA+0.1~0.3mg/l NAA+5~8ml/l山苍子根尖组织提取液+2~4g/l活性炭+5~6g/l珍珠岩;所述继代生根培养的条件为黑暗条件下培养2~4周,温度为24~28℃。 8.根据权利要求1-7任一所述的显著提高山苍子丛生芽生根率的方法,其特征在于,所述山苍子根尖组织提取液的制备方法为: a)取山苍子实生苗幼根根尖组织,液氮研磨成粉,得根尖粉末; b)将所得根尖粉末与甲醇混匀得混合液,经保温、离心后,取上清液,在旋转蒸发仪中去掉上清液中的甲醇后,加入维生素C和蒸馏水即得。 9.根据权利要求8所述的显著提高山苍子丛生芽生根率的方法,其特征在于,步骤a)中,所述根尖组织为山苍子实生苗幼根根尖往上0.5cm处的组织。 10.根据权利要求8所述的显著提高山苍子丛生芽生根率的方法,其特征在于,步骤b)中,所述甲醇为体积分数为80%的甲醇;所述根尖粉末与甲醇的质量体积比为5~8:20~25;所述根尖粉末与维生素C的质量为5~8:0.5~1;所述保温具体为将混合液置于40℃水浴锅中保温5~6小时;所述离心的转速为2000~4000rpm/min,离心的时间为10~15分钟。
摘要:
本发明公开的一种显著提高山苍子丛生芽生根率的方法,包括以下步骤,1)将山苍子丛生芽分离得单个芽;2)将所得单个芽的基部切口用抗褐变剂进行浸泡预处理,所述抗褐变剂中包括虾青素;3)将预处理后的单个芽接种至壮苗培养基进行壮苗培养;4)将壮苗培养后的单个芽转移到初代培养基进行初代生根培养,诱导根原基的形成;5)将经初代生根培养后的单个芽转移到继代培养基进行继代生根培养,得生根苗,所述继代培养基中包括山苍子根尖组织提取液。本发明提供的方法能够在培养过程中大大减少因组织褐变引起的丛生芽死亡,且显著提高了山苍子丛生芽的生根效率和根生长速度,提高了山苍子的快繁效率,促...

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