本研究以钩栗叶片为实验材料, 采用单因素和L_(16)(4~5)正交实验探讨了DNA模板用量、Mg~(2+)浓度、引物用量、Taq DNA聚合酶、dNTP用量以及不同退火温度对钩栗ISSR-PCR扩增的影响, 建立了钩栗ISSR-PCR反应体系。研究结果显示, 优化后的最佳反应体系为, 20μL反应总体系中, 含30 ng模板DNA, 3 mmol/L Mg~(2+), 0.4 mmol/L dNTPs, 0.75 U Taq DNA聚合酶, 0.3μmol/L引物;对钩栗DNA样品材料进行ISSR-PCR扩增体系的检测结果显示, 该优化体系扩增的产物条带清晰, 稳定性高, 本研究为钩栗种质ISSR分子标记遗传结构分析提供技术基础。