硫氰酸钠具有一定的抑菌作用,但属于对人体有毒有害的非食用添加物质.本研究开发并验证一种简单、重现性好的测定原料乳中硫氰酸钠的反相高效液相色谱法.样品采用温水溶解,超声波提取,乙酸锌和亚铁***沉淀蛋白质;测定的最佳色谱条件为:以磷酸盐缓冲液∶乙腈=95:5 (V/V)为流动相等度洗脱,流速为0.8 mL/min,色谱柱温度30℃,检测波长218 nm;硫氰酸钠的检出限为0.484 mg/kg,验证测定结果的相对标准偏差为1.55%,平均加标回收率为82.26%.该法测定样品的预处理简单,检测的精密度、回收率和灵敏度高,适用于原料乳中硫氰酸钠的定量分析.